厭氧箱亦稱(chēng)厭氧工作站或厭氧手套箱。厭氧培養箱是一種在無(wú)氧環(huán)境條件下進(jìn)行細菌培養及操作的專(zhuān)用裝置。它能提供嚴格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養條件和具有一個(gè)系統化、科學(xué)化的工作區域。
(一)操作室厭氧環(huán)境形成:
1.按使用要求放置好必要的附件和器具;
2.通電源開(kāi)照明燈,開(kāi)溫控儀,調節所需溫度;
3.操作室內放入鈀粒(封閉)和干燥劑,并放入美蘭指示紙(封閉);
4.關(guān)緊取樣室內外門(mén),并抽真空校驗;
5.操作室內氮氣置換:
A,把乳膠手套套在觀(guān)察板法蘭圈上并扎緊
B.接通氮氣進(jìn)氣路,打開(kāi)氮氣控制閥,使手套鼓起,關(guān)閉閥門(mén),然后扎緊袋口;
6.操作室氮氣置換重復一次充氮過(guò)程,取樣室先抽真空,并注意隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。如此連續三次氮氣置換。
7.操作室第四次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N285%、H210%、CO25%)
A.調換氣路打開(kāi)混合氣閥進(jìn)氣,充氣時(shí)取樣室先抽真空,并隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣;
B.關(guān)掉混合氣體閥,并打開(kāi)閥,使混合氣體經(jīng)過(guò)流量計,調整流量計,流量為每分鐘10ml左右;
C.混合氣體重復2-3次轉換,經(jīng)過(guò)上述過(guò)程,基本形成厭氧環(huán)境。
8.操作室內打開(kāi)粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時(shí)后打開(kāi)美蘭指示紙觀(guān)察其情況,不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境;
9.開(kāi)紫外線(xiàn)燈,室內進(jìn)行處理,時(shí)間按具體實(shí)驗自定。
(二)菌種的置入和培養:
1.檢查取樣室內門(mén)并關(guān)緊;
2.打開(kāi)取樣室外門(mén),將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門(mén);
3.取樣室充氮置換三次過(guò)程:打開(kāi)真空泵,先抽真空度,然后人工打開(kāi)氮氣閥進(jìn)氣,使指針回復零位,關(guān)掉氮氣閥。重復操作一次。第三次操作時(shí),然后打開(kāi)混合氣體閥進(jìn)混合氣,使指針回復零位,關(guān)掉混合氣體閥。取樣室充氮置換三次過(guò)程結束;
4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數;
5.取樣室外門(mén)開(kāi)啟、關(guān)緊,再抽低真空度檢驗;
6.厭氧培養箱需要連續使用的條件:
A.每天在操作室內打開(kāi)美蘭指示紙觀(guān)察,如不正常就重新?lián)Q氣;
B.要連續輸入微量的混合氣體,使補進(jìn)的氮氣能和微量的氧結合通過(guò)催化吸收,保證室內厭氧狀態(tài);
C.連續培養運行,更換一次除氧劑和干燥劑。
D.操作室內溫度可任意選擇和控制。
7.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整:調節減壓閥,使輸出壓力左右。
厭氧箱發(fā)注意事項
1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;
2.開(kāi)機前應熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說(shuō)明,掌握正確使用方法;
3.培養物放入是在操作室內達到優(yōu)良厭氧環(huán)境后放入;
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內仍可保持10小時(shí)厭氧狀態(tài)(超過(guò)10小時(shí)則根據需要把培養物取出另作處理);
5.經(jīng)常注意氣路有無(wú)漏氣現象;
6.調換氣瓶時(shí),注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;真空泵按要求使用,定期檢查加油。